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[摘 要]阿莫西林在硫酸溶液中的降解产物与Ce（Ⅳ）在罗丹明6G的增敏作用下可产生化学发光。据此建立了流动注射化学发光测定阿莫西林的新方法。该方法线性范围为0.01-20.0mg·L﹣1`，检出限为0.008mg·L﹣1相对标准偏差（n=11，C=1.0mg·L﹣1）为0.7%。方法用于药物中阿莫西林含量的测定，结果满意。
[关键词]流动注射 化学发光法 阿莫西林
中图分类号：P142.22 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）10-0352-01
实际上，阿莫西林是一种新型研制出来的广谱半合成青霉素药物，同样也是一种非常有效的抗生素药品，一般常用于皮肤软组织感染、呼吸道感染等疾病中。而在现行的对阿莫西林测定方法中，有的操作繁琐，有的效果不佳，比较容易受到其他因素的影响。但是，随着化学发光分析法的出现，由于其具备灵敏度高、操作简单的优点，深受药物分析人员的喜爱，并在药物研究领域中得到了十分广泛的应用。对此，本文将重点对流动注射化学发光法测定阿莫西林进行了深入的探讨分析，从而得出以下相关结论，以供参考。
1.阿莫西林流动注射化学发光法的概述
阿莫西林作为一种抗生素类的药物，其自身具备着较强的抗菌性，能够对尿路感染、呼吸道感染引起的疾病进行有效的治疗，相比于传统的氨苄西林来说，阿莫西林的治疗效果更加明显。目前，对阿莫西林的测定方法主要有荧光法、吸光光度法、高效液相色谱法等。这些测定方法都具备了不同的特点。但是，化学发光法对阿莫西林的测定还未见到过相关报道。
一般在酸性的介质中，Ce（Ⅳ）能够与一些化合物发生化学光反应，并且，阿莫西林通常在酸性介质中能够很快的发生水解，并得出水解产物。我们在经过大量试验验证以后发现，其产生的降解产物可以与Ce（Ⅳ）反应之后，产生较微弱的化学发光，同时罗丹明6G也对该发光体系起到了关键的增敏作用。所以，基于这些依据，我们建立了流动注射化学发光法对阿莫西林的测定，这种测定方法不仅具备线性范围宽的优点，还具有较高的灵敏度，实际操作起来非常简单，同时也可以用于对阿莫西林药物含量的测定。
2.试验部分
2.1 仪器与试剂
IFFM-D型流动注射化学发光 光谱 光度分析仪（西安瑞迈电子科技有限公司）；TU-1900双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
阿莫西林标准贮备液：取500.00 mg阿莫西林（中国药品生物制品检定所），用0.1 mol LHCl溶液溶解，过滤，在100 mL棕色容量瓶中定容，冰箱储存；所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。
2.2 实验方法
按图1所示流路，试样阿莫西林溶液（a）与Na2SO3溶液（b）由蠕动泵（P）输送，经三通汇合后，从六通阀（V）定量注射（50μL）到经三通汇合的铁氰化钾溶液（c）与NaOH溶液（d）的混合液中，在流通池（F）中反应产生化学发光，光电倍增管检测器（D）检测发光，信号通过计算机（PC）记录发光信号强度，以峰高定量。
2.3 试验条件的选择
通常情况下，我们可以选择一些具备荧光特质的物质，将其作为化学发光反应中的能量接受体，以此来提高化学发光体系整体的发光强度。而本文实验通过对罗丹明B、罗丹明6G等荧光素进行了深入的试验探讨，具体对其发光体系起到的增敏作用进行了统计分析。大量实验结果显示，在所有的荧光素中，只有罗丹明6G的发光强度最大，其中，发光体系的强度大小将会随着罗丹明6G浓度的变化而发生改变，一般当其浓度发光强度到达极限时，罗丹明6G的浓度也会迅速增大，在经过一段时间后，发光强度将会逐渐减少，导致这种现象发生的主要原因是由于大量罗丹明6G吸收了过多光而引起的。因此我们最终选择了将罗丹明6G作为试验溶液进行以下一系列的测定。
2.4 K3Fe（CN）6浓度
考察了K3Fe（CN）6浓度在1.0×10-5～2.0×10-4mol L浓度范围对化学发光强度的影响情况。当K3Fe（CN）6溶液的浓度低于5.0×10-5mol L时，体系的发光强度随浓度的升高而增大；K3Fe（CN）6溶液的浓度达到5.0×10-5mol L时，体系的发光强度最大；K3Fe（CN）6溶液的浓度大于5.0×10-5mol L时，随着K3Fe（CN）6浓度增加发光强度反而减小。因此实验选择K3Fe（CN）6的最佳浓度为5.0×10-5mol L。
2.5 增敏剂
考察了一些常用的增敏剂：盐酸羟胺、核黄素、罗丹明6G、醋酸奎宁、Na2SO3对该体系的增敏情况，实验表明，Na2SO3和罗丹明6G都能增敏此化学发光强度，其中Na2SO3的增敏效果较好，选用Na2SO3为增敏剂。并且考察了Na2SO3在0.010～0.10 mol L濃度范围内对化学发光强度的影响情况。当Na2SO3溶液的浓度低于0.050 mol L时，体系的发光强度随浓度的升高而增大；Na2SO3溶液的浓度达到0.050 mol L时， 体系的发光强度最大；Na2SO3溶液的浓度大于0.050mol L时，随着Na2SO3浓度增加发光强度反而减小。因此实验选择Na2SO3的浓度为0.050 mol L。
2.6 流路参数
当管径为1 mm，采样环体积固定为50μL，阀间距固定为22 cm时，实验发现，流速增大发光强度增大，体系的发光强度随泵速的增大而增强，但泵速越大，试剂消耗量也越大；另外，影响其信噪比，综合考虑到试剂的使用量和测定的灵敏度，在实验中选择泵速3 mL/min。
2.7 Ce（Ⅳ）浓度对发光强度的影响
试验表明，随着Ce（Ⅳ））浓度的增大，发光强度迅速增强。综合考虑Ce（Ⅳ）在硫酸中的溶解度和信噪比，试验选择Ce（Ⅳ）浓度为0.01一mol·L﹣1 2.8 样品分析
取阿莫西林胶囊10粒，倾出内容物，研细混匀，准确称量，加水溶解过滤，滤液定容至250ml。准确移取上述试液适量稀释后按照试验方法进行测定，同时做标准加入回收试验，结果见表l。
2.9 机理探讨
考察了常用的氧化剂，包括：KMnO4、K3Fe（CN）6、H2O2、K2Cr2O7、KIO4、次氯酸盐、Ce（Ⅳ）等与阿莫西林发生化学发光反应的情况，实验表明，K3Fe（CN）6、KMnO4在碱性环境中可以氧化阿莫西林产生化学发光，Ce（Ⅳ）、KMnO4在酸性介质中可以氧化阿莫西林产生化学发光。
有学者研究了改进后的邻苯三酚-碳酸盐缓冲液化学发光体系，发现不需使用鲁米诺发光试剂，体系便可自氧化，并同时产生很强的化学发光。鉴于本实验所研究体系中的阿莫西林与邻苯三酚均含有酚羟基，NaOH与碳酸盐均起到提供碱性环境的作用，两个体系相似。
3.讨论
当阿莫西林与罗丹明6G合成之后，我们利用八通阀将其注入到Ce（Ⅳ）溶液中，经过混合反应发生了化学发光，其中，阿莫西林的浓度与发光强度均处于平衡的状态，并发现阿莫西林易于在酸性介质中水解，同时水解产物中，将会含有少量的巯基物质，而这种降解产物则会与Ce（Ⅳ） 发生反应之后，发出微弱的化学光，也进一步证实了罗丹明6G具备增敏的特点。其次，我们也发现，罗丹明6G同样也会对K3Fe（CN）6氧化阿莫西林产生一定的增敏作用，一般新配置的K3Fe（CN）6阿莫西林有着较高的发光强度。所以，我们就可以判断出阿莫西林的氧化化学发光强度是与阿莫西林降解产物中巯基物质有着密切的关联。
并且，我们在实验过程中也发现，K3Fe（CN）6不仅可以在酸性介质中对阿莫西林进行氧化，使其发生化学发光反应，同样也能使氨苄西林氧化，产生微弱的化学发光，而这就说明K3Fe（CN）6氧化之后的阿莫西林存在的发光体系并不会受到的苯环中巯基物质的影响。
通过上文叙述，我们大致可以得到反应机理理论：K3Fe（CN）6在酸性介质中发生氧化后，阿莫西林产物的化学发光是与巯基有关。而且，在阿莫西林的分子结構式中，巯基通常又会被氧化为醌式结构，当处于基态时，就会产生化学发光反应。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2000版二部），北京：化学工业出版社，2000
[2] 李媛，郎惠云，李会娥等.分析化学，2000，28（10）：1252
[3] 任乃林，陈宜菲，韩大雄.分析测试技术与仪器，2004，10（1）：50
[关键词]流动注射 化学发光法 阿莫西林
中图分类号：P142.22 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）10-0352-01
实际上，阿莫西林是一种新型研制出来的广谱半合成青霉素药物，同样也是一种非常有效的抗生素药品，一般常用于皮肤软组织感染、呼吸道感染等疾病中。而在现行的对阿莫西林测定方法中，有的操作繁琐，有的效果不佳，比较容易受到其他因素的影响。但是，随着化学发光分析法的出现，由于其具备灵敏度高、操作简单的优点，深受药物分析人员的喜爱，并在药物研究领域中得到了十分广泛的应用。对此，本文将重点对流动注射化学发光法测定阿莫西林进行了深入的探讨分析，从而得出以下相关结论，以供参考。
1.阿莫西林流动注射化学发光法的概述
阿莫西林作为一种抗生素类的药物，其自身具备着较强的抗菌性，能够对尿路感染、呼吸道感染引起的疾病进行有效的治疗，相比于传统的氨苄西林来说，阿莫西林的治疗效果更加明显。目前，对阿莫西林的测定方法主要有荧光法、吸光光度法、高效液相色谱法等。这些测定方法都具备了不同的特点。但是，化学发光法对阿莫西林的测定还未见到过相关报道。
一般在酸性的介质中，Ce（Ⅳ）能够与一些化合物发生化学光反应，并且，阿莫西林通常在酸性介质中能够很快的发生水解，并得出水解产物。我们在经过大量试验验证以后发现，其产生的降解产物可以与Ce（Ⅳ）反应之后，产生较微弱的化学发光，同时罗丹明6G也对该发光体系起到了关键的增敏作用。所以，基于这些依据，我们建立了流动注射化学发光法对阿莫西林的测定，这种测定方法不仅具备线性范围宽的优点，还具有较高的灵敏度，实际操作起来非常简单，同时也可以用于对阿莫西林药物含量的测定。
2.试验部分
2.1 仪器与试剂
IFFM-D型流动注射化学发光 光谱 光度分析仪（西安瑞迈电子科技有限公司）；TU-1900双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
阿莫西林标准贮备液：取500.00 mg阿莫西林（中国药品生物制品检定所），用0.1 mol LHCl溶液溶解，过滤，在100 mL棕色容量瓶中定容，冰箱储存；所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。
2.2 实验方法
按图1所示流路，试样阿莫西林溶液（a）与Na2SO3溶液（b）由蠕动泵（P）输送，经三通汇合后，从六通阀（V）定量注射（50μL）到经三通汇合的铁氰化钾溶液（c）与NaOH溶液（d）的混合液中，在流通池（F）中反应产生化学发光，光电倍增管检测器（D）检测发光，信号通过计算机（PC）记录发光信号强度，以峰高定量。
2.3 试验条件的选择
通常情况下，我们可以选择一些具备荧光特质的物质，将其作为化学发光反应中的能量接受体，以此来提高化学发光体系整体的发光强度。而本文实验通过对罗丹明B、罗丹明6G等荧光素进行了深入的试验探讨，具体对其发光体系起到的增敏作用进行了统计分析。大量实验结果显示，在所有的荧光素中，只有罗丹明6G的发光强度最大，其中，发光体系的强度大小将会随着罗丹明6G浓度的变化而发生改变，一般当其浓度发光强度到达极限时，罗丹明6G的浓度也会迅速增大，在经过一段时间后，发光强度将会逐渐减少，导致这种现象发生的主要原因是由于大量罗丹明6G吸收了过多光而引起的。因此我们最终选择了将罗丹明6G作为试验溶液进行以下一系列的测定。
2.4 K3Fe（CN）6浓度
考察了K3Fe（CN）6浓度在1.0×10-5～2.0×10-4mol L浓度范围对化学发光强度的影响情况。当K3Fe（CN）6溶液的浓度低于5.0×10-5mol L时，体系的发光强度随浓度的升高而增大；K3Fe（CN）6溶液的浓度达到5.0×10-5mol L时，体系的发光强度最大；K3Fe（CN）6溶液的浓度大于5.0×10-5mol L时，随着K3Fe（CN）6浓度增加发光强度反而减小。因此实验选择K3Fe（CN）6的最佳浓度为5.0×10-5mol L。
2.5 增敏剂
考察了一些常用的增敏剂：盐酸羟胺、核黄素、罗丹明6G、醋酸奎宁、Na2SO3对该体系的增敏情况，实验表明，Na2SO3和罗丹明6G都能增敏此化学发光强度，其中Na2SO3的增敏效果较好，选用Na2SO3为增敏剂。并且考察了Na2SO3在0.010～0.10 mol L濃度范围内对化学发光强度的影响情况。当Na2SO3溶液的浓度低于0.050 mol L时，体系的发光强度随浓度的升高而增大；Na2SO3溶液的浓度达到0.050 mol L时， 体系的发光强度最大；Na2SO3溶液的浓度大于0.050mol L时，随着Na2SO3浓度增加发光强度反而减小。因此实验选择Na2SO3的浓度为0.050 mol L。
2.6 流路参数
当管径为1 mm，采样环体积固定为50μL，阀间距固定为22 cm时，实验发现，流速增大发光强度增大，体系的发光强度随泵速的增大而增强，但泵速越大，试剂消耗量也越大；另外，影响其信噪比，综合考虑到试剂的使用量和测定的灵敏度，在实验中选择泵速3 mL/min。
2.7 Ce（Ⅳ）浓度对发光强度的影响
试验表明，随着Ce（Ⅳ））浓度的增大，发光强度迅速增强。综合考虑Ce（Ⅳ）在硫酸中的溶解度和信噪比，试验选择Ce（Ⅳ）浓度为0.01一mol·L﹣1 2.8 样品分析
取阿莫西林胶囊10粒，倾出内容物，研细混匀，准确称量，加水溶解过滤，滤液定容至250ml。准确移取上述试液适量稀释后按照试验方法进行测定，同时做标准加入回收试验，结果见表l。
2.9 机理探讨
考察了常用的氧化剂，包括：KMnO4、K3Fe（CN）6、H2O2、K2Cr2O7、KIO4、次氯酸盐、Ce（Ⅳ）等与阿莫西林发生化学发光反应的情况，实验表明，K3Fe（CN）6、KMnO4在碱性环境中可以氧化阿莫西林产生化学发光，Ce（Ⅳ）、KMnO4在酸性介质中可以氧化阿莫西林产生化学发光。
有学者研究了改进后的邻苯三酚-碳酸盐缓冲液化学发光体系，发现不需使用鲁米诺发光试剂，体系便可自氧化，并同时产生很强的化学发光。鉴于本实验所研究体系中的阿莫西林与邻苯三酚均含有酚羟基，NaOH与碳酸盐均起到提供碱性环境的作用，两个体系相似。
3.讨论
当阿莫西林与罗丹明6G合成之后，我们利用八通阀将其注入到Ce（Ⅳ）溶液中，经过混合反应发生了化学发光，其中，阿莫西林的浓度与发光强度均处于平衡的状态，并发现阿莫西林易于在酸性介质中水解，同时水解产物中，将会含有少量的巯基物质，而这种降解产物则会与Ce（Ⅳ） 发生反应之后，发出微弱的化学光，也进一步证实了罗丹明6G具备增敏的特点。其次，我们也发现，罗丹明6G同样也会对K3Fe（CN）6氧化阿莫西林产生一定的增敏作用，一般新配置的K3Fe（CN）6阿莫西林有着较高的发光强度。所以，我们就可以判断出阿莫西林的氧化化学发光强度是与阿莫西林降解产物中巯基物质有着密切的关联。
并且，我们在实验过程中也发现，K3Fe（CN）6不仅可以在酸性介质中对阿莫西林进行氧化，使其发生化学发光反应，同样也能使氨苄西林氧化，产生微弱的化学发光，而这就说明K3Fe（CN）6氧化之后的阿莫西林存在的发光体系并不会受到的苯环中巯基物质的影响。
通过上文叙述，我们大致可以得到反应机理理论：K3Fe（CN）6在酸性介质中发生氧化后，阿莫西林产物的化学发光是与巯基有关。而且，在阿莫西林的分子结構式中，巯基通常又会被氧化为醌式结构，当处于基态时，就会产生化学发光反应。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2000版二部），北京：化学工业出版社，2000
[2] 李媛，郎惠云，李会娥等.分析化学，2000，28（10）：1252
[3] 任乃林，陈宜菲，韩大雄.分析测试技术与仪器，2004，10（1）：50