【摘 要】
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目的：建立构建新疆一枝蒿cDNA文库的方法.方法：采用改良Trizol法提取一枝蒿幼嫩叶片总RNA,反转录成单链cD-NA,长距离聚合酶链反应法（LD-PCR）合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化,
【机 构】
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新疆维吾尔自治区药物研究所/新疆维吾尔药重点实验室
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区公益性科研院所基本科研业务经费资助项目（No.KY2015121）,新疆维吾尔自治区青年科技创新人才培养工程项目（No.2013721034）
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目的：建立构建新疆一枝蒿cDNA文库的方法.方法：采用改良Trizol法提取一枝蒿幼嫩叶片总RNA,反转录成单链cD-NA,长距离聚合酶链反应法（LD-PCR）合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化,采用sfiⅠ酶切,酶切产物用CHROMA SPIN-400柱分级分离,回收0.4 kb以上的cDNA,以λTriplE×2噬菌体连接并进行体外蛋白包装,利用SMART技术构建一枝蒿全长cDNA文库;随机挑取文库中20个单克隆,电泳法测定原始文库滴度、文库容量、cDNA插入片段的重组阳性率与大小.
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