【摘 要】
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目的探讨上调血红素氧合酶-1(HO-1)对尿酸介导的脂肪细胞功能障碍的影响及可能机制。 方法体外培养人类骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),选用2~3代的MSCs。在脂肪细胞诱导分化培养基中继续培养,分别加入不同浓度的果糖、尿酸,确定最佳浓度。在此基础上,分别依次加入HO-1诱导物钴原卟啉(CoPP)及HO-1活性抑制剂锡中卟啉(SnMP),每组5个独立样本。采用分光光度计法测量MSCs衍生的脂肪
【机 构】
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100853 北京 解放军总医院南楼心内科 国家老年疾病临床研究中心,100853 北京 解放军总医院南楼心内科 国家老年疾病临床研究中心,100853 北京 解放军总医院南楼心内科 国家老年疾病临床
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目的探讨上调血红素氧合酶-1(HO-1)对尿酸介导的脂肪细胞功能障碍的影响及可能机制。
方法体外培养人类骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),选用2~3代的MSCs。在脂肪细胞诱导分化培养基中继续培养,分别加入不同浓度的果糖、尿酸,确定最佳浓度。在此基础上,分别依次加入HO-1诱导物钴原卟啉(CoPP)及HO-1活性抑制剂锡中卟啉(SnMP),每组5个独立样本。采用分光光度计法测量MSCs衍生的脂肪细胞脂肪形成的量、脂滴大小,采用免疫印迹法检测黄嘌呤氧化酶(XO)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶的表达水平,采用发光光谱仪测量超氧化物的水平,采用实时聚合酶链反应(PCR)测量脂肪形成标记物及HO-1的水平。
结果与对照组比较,浓度为500 μmol/L的果糖、50 mg/L的尿酸分别使脂肪形成量增加(均P<0.05)。使用果糖处理的MSCs衍生的脂肪细胞中XO和尿酸的水平高于对照组(P<0.05),同时使用果糖和CoPP处理MSCs可有效地将XO和尿酸降低至对照组水平,加入SnMP后则消除了CoPP的有益效果。与对照组比较,尿酸处理后小脂滴的数目减少(P<0.05),脂肪形成标记物Mest、FAS、PPARγ及C/EBPα的水平及NADPH氧化酶、超氧化物的水平升高(均P<0.05),尿酸与CoPP的同时使用可有效地将上述指标逆转至对照组水平。尿酸降低了Wnt10b的表达,但对HO-1表达无影响。同时加入CoPP后,HO-1和Wnt10b表达增加至高于对照组的水平(均P<0.05)。
结论上调HO-1可降低XO、尿酸及MSCs衍生的脂肪细胞脂肪生成的水平,降低脂肪形成标记物及NADPH氧化酶和超氧化物的水平,发挥抗氧化应激的作用。HO-1激动剂未来可能会成为老年肥胖和代谢综合征患者的靶器官损伤及体质指数控制的治疗靶点。
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