【摘 要】
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建立了大鼠纹状体细胞膜色谱前沿分析法,研究5-羟色胺(5-HT)受体5-HT1D与藁本内酯的亲和作用。通过大鼠纹状体组织制备得到色谱固定相,利用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)分别
【基金项目】
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陕西省中医药管理局科研课题(13-ZY005)
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建立了大鼠纹状体细胞膜色谱前沿分析法,研究5-羟色胺(5-HT)受体5-HT1D与藁本内酯的亲和作用。通过大鼠纹状体组织制备得到色谱固定相,利用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)分别测定硅胶吸附前后细胞膜悬液中5-HT的量,求得细胞膜固定相上5-HT受体含量为每克硅胶(40.5±2.3)pg。利用细胞膜色谱与液相色谱的离线联用,特异性地识别混合对照品中的舒马普坦和藁本内酯;以不同浓度(24.2~242 nmol/L)的5-HT1D受体激动剂舒马普坦为模型药物,连续通过细胞膜色谱柱,记录舒马普坦的突破曲线,测得舒马普坦与受体作用的平衡解离常数(KD)为389 nmol/L;并将舒马普坦通过不同浓度(37.0~370 nmol/L)的藁本内酯饱和后的细胞膜色谱柱,记录色谱柱饱和前后舒马普坦突破曲线的变化,测得藁本内酯与受体作用的KD值为4.21μmol/L。该方法快速、有效,适用于求解存在竞争结合时药物与受体作用的平衡解离常数。
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