细胞周期蛋白E小干扰RNA靶向调控乳腺癌细胞的生长

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目的 研究乳腺癌细胞中细胞周期蛋白E(cyclin E)对乳腺癌细胞肿瘤生物学特征的影响。方法 用带有cyclin E小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体pEGFP/CCNE2转染乳腺癌细胞系MCF-7。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法分别在RNA水平和蛋白水平检测siRNA对细胞内cyclin E表达水平的影响,CCK-8方法检测转染后细胞株生长增殖能力以及对化疗药物的敏感性,流式细胞仪检测细胞周期的变化,裸鼠移植瘤成瘤实验检测转染后细胞成瘤能力的变化。结果 pEGFP/CCNE2转染后,MCF-7细胞内cyclin E的表达受到抑制,cyclin E mRNA相对表达水平为0.23±0.05,蛋白相对表达水平为0.24±0.05;细胞的生长增殖能力下降,抑制率为68.56%±0.08%,对化疗药物的敏感性增加;细胞被大量阻滞在G1期,G1期细胞占77.38%。细胞的成瘤能力降低,移植瘤体积缩小。结论 抑制乳腺癌细胞中cyclin E的表达能够抑制乳腺癌细胞的生长、分化和增殖,提高肿瘤对化疗药物的敏感性。

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