【摘 要】
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目的从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测。方法制备F0F1-ATPaseε亚基
【机 构】
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长沙市疾病预防控制中心,中国科学院生物物理研究所,
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目的从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测。方法制备F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体,通过亲和素-生物素系统的连接作用,以EV71抗体为检测工具,构建一种新的F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-EV71抗体的免疫生物传感器,通过比较其检测前后ATP催化合成量的不同,实现对EV71病毒的快速检测。同时,合成用于EV71检测的特异性引物探针,比较2种检测方法的结果。结果 RT-PCR检测灵敏度为10-7mg/ml,检测时间约3 h;生物传感器检测灵敏度为10-7mg/ml,但整个实验过程仅需30 min。结论利用F0F1-ATPase构建的免疫生物传感器可用于EV71感染的快速检测,具有一定的应用前景。
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