甘草酸二铵对四氯化碳诱导肝纤维化模型小鼠氧化应激损伤的保护作用

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目的:明确甘草酸二铵对四氯化碳诱导肝纤维化模型小鼠氧化应激损伤的保护作用,探讨其治疗肝纤维化可能的作用机制.方法:采用四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化小鼠模型,于成模后随机分为5组:正常组、模型组、阳性药组(水飞蓟宾100 mg/kg)、甘草酸二铵低剂量组(68 mg/kg)和甘草酸二铵高剂量组(136 mg/kg),周期为4周.待末次给药1 h后,麻醉取血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的含量;解剖肝脏称重后,计算肝脏指数,常规HE染色,观察各组小鼠肝组织病理学改变,masson及天狼星红染色,观察各组小鼠肝脏纤维化程度;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况;荧光定量PCR检测各组小鼠肝组织中抗氧化相关基因表达情况;肝组织匀浆测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)抗氧化指标水平.结果:与正常组比较,模型组小鼠体重显著降低(P<0.01),肝指数显著升高(P<0.01);模型组小鼠血清中ALT和AST水平显著升高(P<0.01),ALB和TP水平显著降低(P<0.01);SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.01),MDA水平明显上升(P<0.01).masson及天狼星红染色结果表明模型组小鼠肝组织纤维含量显著增加(P<0.01);模型组小鼠肝组织中转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、人血红素加氧酶1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)和醌NADH脱氢酶1(NQO1)mRNA表达显著下降(P<0.01).与模型组比较,阳性药组(P<0.05)、甘草酸二铵低剂量组(P<0.05)和甘草酸二铵高剂量组(P<0.01)小鼠体重显著上升;小鼠肝指数显著下降(P<0.01).血清ALT及AST水平显著降低(P<0.01);血清ALB及TP水平显著升高(P<0.05,P<0.01);SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01).masson及天狼星红染色结果表明,甘草酸二铵干预可显著减少肝纤维化模型小鼠肝组织中纤维沉积(P<0.01).阳性药组、甘草酸二铵低剂量和甘草酸二铵高剂量组小鼠肝组织中Nrf2、HO-1、GCLC和NQO1 mRNA明显上升(P<0.05,P<0.01).结论:甘草酸二铵能够改善肝纤维化模型动物纤维化水平,其作用机制可能与调控氧化应激反应,保护肝脏功能有关.
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