【摘 要】
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目的 研究旋毛虫重组35.5 ku蛋白的免疫诊断价值. 方法 通过RT-PCR扩增旋毛虫35.5 ku蛋白基因TspSP-1.2,构建重组质粒pUC18-TspSP-1.2,测序正确后亚克隆至表达载体pET-30a(+)
【机 构】
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郑州大学医学院寄生虫学教研室,河南郑州,450052
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目的 研究旋毛虫重组35.5 ku蛋白的免疫诊断价值. 方法 通过RT-PCR扩增旋毛虫35.5 ku蛋白基因TspSP-1.2,构建重组质粒pUC18-TspSP-1.2,测序正确后亚克隆至表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达载体pET30a(+)-TspSP-1.2,转化大肠埃希菌BL21( DE3),以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白的抗原性. 结果 构建的重组表达载体pET-30a(+)-TspSP-1.2能够表达旋毛虫35.5ku蛋白,该重组蛋白可被旋毛虫感染小鼠血清、旋毛虫ES抗原免疫鼠血清及旋毛虫患者血清识别,与日本血吸虫、并殖吸虫、华支睾吸虫患者及正常人血清均无交叉反应,但与猪囊尾蚴患者血清有交叉反应. 结论 旋毛虫重组35.5 ku蛋白可作为旋毛虫病免疫诊断的候选抗原.
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