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目的
制备由H5N1亚型人禽流感病毒血凝素(HA)和基质蛋白1(M1)两种结构蛋白组装而成的H5亚型流感病毒样颗粒(viruslike particles，VLPs) 并检测其生物活性。
方法构建同时包含A/Indonesia/05/2005(H5N1) HA和A/Anhui/01/2005(H5N1) M1基因的重组转移载体pFBD-M1-HA，筛选获得重组杆粒(重组杆状病毒质粒)rBacmid-M1-HA后，转染Spodoptra frugiperda (Sf9)昆虫细胞，包装重组杆状病毒rBV-M1-HA；Western blot和间接免疫荧光鉴定HA和M1的表达；大量制备并纯化后，在透射电镜下观察VLPs的形态结构；血凝试验检测VLPs的生物活性。
结果应用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达H5N1 HA和M1两种结构蛋白可以高效组装产生流感VLPs，纯化后的VLPs血凝效价为1024 HAU/50 μl。
结论成功利用A/Indonesia/05/2005(H5N1)来源HA和A/Anhui/01/2005(H5N1)来源M1两种结构蛋白，在杆状病毒表达系统中制备有较好生物活性的人禽流感病毒H5亚型VLPs，为下一步研究人H5亚型禽流感VLPs疫苗奠定基础。