【摘 要】
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为进一步研究半滑舌鳎midkine（MK）成熟肽活性与功能,对半滑舌鳎生长因子MK成熟肽进行定点改造及原核表达。根据大肠杆菌偏爱密码子的特点,实验利用SOEing PCR法对半滑舌鳎MK成
【机 构】
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中国海洋大学海洋生命学院,青岛市海洋与渔业局,国家海洋局北海环境监测中心
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为进一步研究半滑舌鳎midkine（MK）成熟肽活性与功能,对半滑舌鳎生长因子MK成熟肽进行定点改造及原核表达。根据大肠杆菌偏爱密码子的特点,实验利用SOEing PCR法对半滑舌鳎MK成熟肽进行定点突变。将改造后的半滑舌鳎成熟肽MK克隆到载体质粒pET32a（＋）,构建原核表达载体pET32a（＋）-MK,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株中。SDS-PAGE结果显示,与对照组相比,经IPTG诱导表达后半滑舌鳎重组蛋白MK存在于大肠杆菌上清液中,产物相对分子质量约为33 ku。研究表明,本
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