【摘 要】
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目的 建立单胺类神经递质多巴胺(DA)及去甲肾上腺素(NE)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),探讨天麻乙酸乙酯萃取物对帕金森病(PD)大鼠脑组织中DA及NE含量的影响.方法 ①色谱条件:色谱柱:QU-3C18-15021型C18反相色谱柱(150 mm×2.1 mm);流动相为:水相∶有机相(90r∶10,V/V)[其中水相为磷酸二氢钾(0.076 mol/L),辛烷磺酸钠(25 mg/L),用磷酸调节pH至4.6;有机相为甲醇];流速:0.1 mL/min;柱温:28℃.电化学检测器工作
【机 构】
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云南中医药大学,云南 昆明650500
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目的 建立单胺类神经递质多巴胺(DA)及去甲肾上腺素(NE)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD),探讨天麻乙酸乙酯萃取物对帕金森病(PD)大鼠脑组织中DA及NE含量的影响.方法 ①色谱条件:色谱柱:QU-3C18-15021型C18反相色谱柱(150 mm×2.1 mm);流动相为:水相∶有机相(90r∶10,V/V)[其中水相为磷酸二氢钾(0.076 mol/L),辛烷磺酸钠(25 mg/L),用磷酸调节pH至4.6;有机相为甲醇];流速:0.1 mL/min;柱温:28℃.电化学检测器工作电极:玻璃碳电极;参比电极:银/氯化银(Ag/AgCl)电极;检测电压:+0.7 V.②天麻乙酸乙酯萃取物对大鼠脑组织中神经递质含量的影响:选取健康成年SD大鼠,采用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立PD大鼠模型.随机分为8组,即空白对照组、假手术组、模型对照组、阳性对照组(美多芭7.8 mg/kg)、吐温溶剂组、天麻乙酸乙酯萃取物低剂量组(5 g生药/kg)、中剂量组(10 g生药/kg)、高剂量组(20 g生药/kg).各组灌胃给药治疗30 d.于末次给药2 h后分离取出大鼠脑组织,经处理后采用HPLC-ECD测定脑组织中神经递质-DA、NE的含量变化.结果 ①HPLC-ECD方法学考察结果表明,在本色谱条件下可以很好的分离单胺类递质DA、NE(R＞1.5),且阴性对照(空白溶剂)在相应位置无干扰,线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率良好,可以用于DA、NE的检测;②样品检测结果表明,与模型组比较,天麻乙酸乙酯萃取物高剂量组(20 g生药/kg)能显著增加PD大鼠脑中DA的含量(P＜0.05),天麻乙酸乙酯萃取物低、中、高剂量组(5、10、20g生药/kg)对NE亦有明显增高作用(P＜0.05).结论 采用HPLC-ECD方法进行单胺类神经递质DA、NE的检测,方法简便,结果准确;其检测结果表明,天麻乙酸乙酯萃取物能升高脑内单胺类神经递质的水平,显示出抗PD的作用.
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