【摘 要】
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采用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV) C株全长cDNA的3个待改造片段,分别克隆于pMD18-T载体后进行测序.用重组技术
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,西北农林科技大学,河南职业技术师范学院
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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采用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV) C株全长cDNA的3个待改造片段,分别克隆于pMD18-T载体后进行测序.用重组技术分别从前期构建的5半长cDNA或3半长cDNA中替换F1、F3和F51,构建成2个新的半长cDNA,进一步连接成新的全长cDNA,经测序证实全长cDNA中3个致死性突变位点均得到改正.初步鉴定证明该全长cDNA具有感染性.为猪瘟病毒C株反向遗传操作系统的建立奠定了基础.
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