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目的
探讨Hippo-Yes相关蛋白(YAP)信号通路在复制性老化髓核细胞中的作用机制。
方法取人源髓核细胞(NPCs)为研究对象，根据老化特性及慢病毒干扰载体不同进行分组，即A组：未老化第三代NPCs，B组：第十代老化NPCs，A和B两组根据转染不同的慢病毒载体shYAP或sh-Control再分两个亚组，分别是A sh-Control组，A shYAP组，B sh-Control组和B shYAP组。体外培养第三代NPCs，通过连续传代诱导建立复制性老化细胞模型(RS)，细胞衰老SA-β-Gal染色检测分析老化与未老化NPCs生物学特性。慢病毒载体shYAP和sh-Control分别转染老化和未老化NPCs，检测Hippo-YAP信号通路干预情况及对下游靶基因CYR61的表达影响。最后，SA-β-Gal染色检测分析各个亚组老化与未老化NPCs生物学特性和老化率。
结果B组SA-β-Gal染色显示NPCs蓝色团块数目高于A组(90.4%比15.6%，P<0.05)；A组可见YAP基因和蛋白水平表达高于B组(0.77±0.12比0.31±0.04，0.52±0.06比0.12±0.05，P<0.05)，免疫荧光显示YAP主要位于细胞核内(85%)。B组细胞Hippo-YAP信号通路激活，YAP及其靶基因CYR61的基因水平和蛋白水平降低，且YAP分布由核内转移至胞质内，胞质YAP比例增加(56%)。B组中两亚组细胞均显示出老化细胞特有的的外观表现，shYAP慢病毒载体转染老化NPCs后对其细胞老化率无明显影响(P>0.05)。
结论Hippo-YAP信号通路参与NPCs老化的发生发展，对维持细胞的生长、增殖发挥着重要作用。