论文部分内容阅读
目的:探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂米哚妥林(PKC412)对HL-60细胞株增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:采用CCK-8法检测不同浓度PKC412对HL-60细胞增殖的影响;瑞士吉姆萨染色法鉴定PKC412对HL-60细胞凋亡的影响;qRT-PCR检测BCL-2、P53基因的mRNA表达,Western blot检测BCL-2、P53蛋白的表达;以尾静脉注射HL-60细胞构建急性白血病小鼠模型,以PKC412 31.25 nmol/kg尾静脉给药,生理盐水组作为对照组,研究PKC412在小鼠体内对HL-60细胞的抑制;ELISA法检测PKC412对肿瘤小鼠细胞因子TNF-α和TGF-β分泌的影响.结果:PKC412抑制HL-60细胞株细胞增殖,呈剂量依赖性(r=0.9973),其中IC50 =0.31 μmol/L;并能诱导HL-60细胞凋亡.PKC412作用HL-60细胞株48 h后,与对照组比较BCL-2基因mRNA表达下调(0.417±0.044vs 0.933 ±0.033,t=9.347,P＜0.001),P53基因mRNA表达上调(1.533 ±0.145 vs 1.050 ±0.161,t=2.231,P＞0.05);BCL-2蛋白表达量下降,P53蛋白表达量升高.PKC412在体内可抑制HL-60肿瘤细胞生长,给药后小鼠生存率为50％,与对照组比较体重增加(18.02± 0.403 gvs 16.44± 0.562 g,t =2.272,P =0.0356).PKC412组血清及脾细胞中TNF-α和TGF-β细胞因子较对照组分泌明显减少(P＜0.05).结论:PKC412能通过抑制BCL-2基因表达水平诱导HL-60细胞凋亡,体内给药可抑制肿瘤的生长.