【摘 要】
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目的 筛选出能促进分枝杆菌对巨噬细胞侵入的功能性结核基因并进行验证. 方法 将H37Rv RD10-16区的18个结核分枝杆菌(MTB)基因构建到pMV261载体上,然后将重组pMV261质粒电转
【机 构】
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武汉大学基础医学院免疫学系,病毒学国家重点实验室,湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室和医学研究院,湖北武汉430071
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目的 筛选出能促进分枝杆菌对巨噬细胞侵入的功能性结核基因并进行验证. 方法 将H37Rv RD10-16区的18个结核分枝杆菌(MTB)基因构建到pMV261载体上,然后将重组pMV261质粒电转至耻垢分枝杆菌M.smegmatis (Ms)中,并将各重组菌株命名为rMs::Rvs.运用菌落计数法筛选功能性基因;采用流式细胞术Flow cytometry(FCM),动物实验验证该基因的功能. 结果 菌落计数显示rMs::Rv1773c组菌落数最多,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);FCM验证Rv1773c促进Ms入侵巨噬细胞能力较强,rMs::Rv1773c组感染小鼠脾脏菌落数增多.结论 筛选的RD14区功能性结核基因Rv1773c可能作为结核菌毒力因子,具备促进分枝杆菌入侵巨噬细胞的功能.
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