【摘 要】
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目的 探讨载基因仿生基质材料能否调控骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞定向分化.方法 将非病毒载体K16GRGDSPC共价接枝于新型骨基质材料聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇(
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科
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目的 探讨载基因仿生基质材料能否调控骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞定向分化.方法 将非病毒载体K16GRGDSPC共价接枝于新型骨基质材料聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇(PLGA-[ASP-PEG])构建非病毒基因转染体系.该体系与转化生长因子(TGF)-β1基因复合制备成载基因仿生基质材料pcDNA3-TGF-β1/K16GRGDSPC/PLGA-[ASP-PEG],并将兔BMSCs与其复合培养,以pcDNA3/K16GRGDSPC/PLGA-[ASP-PEG]作为对照.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测TGF-β1基因的表达;应用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测BMSCs的ALP活性,并通过RT-PCR检测细胞ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原的表达,通过免疫荧光染色检测核心结合因子a1(Cbfa1)表达,观察BMSCs向成骨细胞方向分化的情况.结果 XPS图谱证实K16GRGDSPC被成功地接枝到PLGA-[ASP-PEG]表面.载基因仿生基质材料复合BMSCs培养结果表明,TGF-β1基因被成功地导入细胞内并表达,而且其成骨标志物(ALP、OCN、OPN、Ⅰ型胶原和Cfba1)的表达均显著高于对照组(P＜0.05).结论 这种载基因基质材料既可以作为骨组织工程支架材料,又可介导外源TGF-β1基因转染BMSCs并定向调控BMSCs成骨分化.
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