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目的:探讨细胞因子IL-2、IL-12、IL-15和IL-18组合对体外扩增人外周血来源的NK细胞受体表达及杀伤肿瘤细胞能力。方法:NK细胞的培养分为CIK组、IL-2+IL-15组和IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组;流式细胞术检测培养的细胞表型及NK细胞受体表达;LDH法检测不同效靶比NK细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤作用。结果:外周血淋巴细胞经细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合作用下,17d后NK细胞(CD3-CD56+)比例上升至80%以上,NK细胞数扩增>1 000倍,明显高于其他两组,F=37.154,P<0.001。NK细胞活化标志CD69+分子增加(t=21.271,P<0.001),NK细胞活化性受体(NKG2D、NKp30、NKp44和NKp46)均有不同程度上调(P值均<0.05),而NK细胞抑制性受体CD158b(t=3.416,P=0.021)和CD159a(t=4.209,P=0.018)不同程度下调,T淋巴细胞、B淋巴细胞(CD19+)、单核巨噬细胞(CD14+)、调节性T细胞(T-reg)等均显著减少,P<0.001。对扩增的NK细胞杀伤敏感的肿瘤细胞株均高表达MHCⅠ类相关蛋白A(major histocompatibility complex classⅠchain related molecules A,MICA),MICA表达分别为K562(46.2±3.2)%、MCF-7(56.5±4.7)%、HTC-8(52.5±4.1)%和Eca-109(36.5±2.5)%,而对NK细胞抵抗的细胞株均低表达或不表达MICA分子,分别为Raji 0、MDA-MB-435s0和HT-29(1.2±0.8)%。结论:细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合能有效的扩增外周血来源NK细胞,上调其活化性受体,下调抑制性受体,其数量及功能均满足临床治疗需要。