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目的
研究转录共激活因子(TAZ)在金雀异黄酮(Gen)促进小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。
方法全骨髓贴壁法原代培养小鼠BMSCs，测定碱性磷酸酶(ALP)活性、钙(Ca)沉积量、骨唾液酸蛋白(BSP)和骨钙素(OC)表达水平反映BMSCs向成骨细胞分化状况；设计并合成针对TAZ的siRNA(siTAZ)转染BMSCs，在成骨定向分化培养基中添加Gen，比较siTAZ转染组与siTAZ未转染组成骨细胞分化状况；免疫共沉淀实验观察TAZ和成骨细胞特异性转录因子cbfa1的结合，并观察Gen对TAZ表达及其与cbfa1结合的影响。
结果BMSCs向成骨细胞诱导分化过程检测到TAZ表达，siTAZ转染后ALP活性、Ca沉积量显著降低。Gen剂量依赖性(0.01 μmol/L、0.1 μmol/L、1 μmol/L)刺激TAZ蛋白表达增加；Gen(1 μmol/L)不仅增加TAZ总蛋白表达，还促使TAZ向细胞核内移位，Gen(1 μmol/L)显著提高培养细胞ALP活性、Ca沉积量以及BSP和OC表达水平，而在siTAZ转染组则未见明显变化；免疫共沉淀证实TAZ可以直接与cbfa1结合，Gen(1 μmol/L)可使TAZ与cbfa1结合增强。
结论TAZ参与了BMSCs向成骨细胞分化过程，Gen可通过增强TAZ表达及核移位促进BMSCs向成骨细胞分化。