hIL-2／IFN-1嵌合基因原核表达质粒的构建与表达

来源 :华南理工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lau_lfm

【摘要】

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为构建hIL-2／IFN-1嵌合基因原核表达质粒，筛选其高效表达工程菌，设计特异性引物，PCR扩增目的基因并克隆至pPROEX HTb质粒Nci Ⅰ／HindⅢ位点，经双酶切及序列测定筛选阳性克隆，IFTG诱

【作者】

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邵亚明田泽维罗发兴陈光明杨富强

【机构】

：

解放军458医院全军肝病研究中心,华南理工大学轻工与食品学院

【出处】

：

华南理工大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

白细胞介素-2 干扰素-1 嵌合基因表达大肠杆菌 hIL-2 hIFN-γ chimeric gene expression E. coli

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划 (86 3计划 )资助项目(2 0 0 1AA2 1714 1)

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为构建hIL-2／IFN-1嵌合基因原核表达质粒，筛选其高效表达工程菌，设计特异性引物，PCR扩增目的基因并克隆至pPROEX HTb质粒Nci Ⅰ／HindⅢ位点，经双酶切及序列测定筛选阳性克隆，IFTG诱导工程菌后以SDS-PAGE电泳鉴定目的蛋白的表达情况，并测定其抗原性和生物学活性，结果成功构建了工程菌Top10F’[hIL-2／IFN-γ]，经优化表达条件后，目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的30％，分子质量约为34ku．ELISA和Westen-blot实验结果表明，目的蛋白能特异性结合抗IFN-

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