【摘 要】
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目的：获得NR2B羧基端多肽（NR2Pep）,探讨TAT-NR2Pep在细胞中的跨膜特性。方法：利用酶切连接方法构建p Waldo-TAT-pep质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,检测不同浓度诱导剂和不
【机 构】
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徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室,徐州医科大学麻醉学院,徐州医科大学临床学院,徐州市中心医院、东南大学附属医院妇产科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81600969);江苏省大学生创新创业训练计划(201710313031Y)
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目的：获得NR2B羧基端多肽（NR2Pep）,探讨TAT-NR2Pep在细胞中的跨膜特性。方法：利用酶切连接方法构建p Waldo-TAT-pep质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,检测不同浓度诱导剂和不同温度对蛋白质表达的影响;利用镍柱亲和层析及分子筛方法纯化TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白,利用GFP发荧光的特性采用In-gel检测蛋白质的表达情况;以融合蛋白C端His标签特异性抗体,通过Western印迹确定融合蛋白的表达;荧光显微镜下观察TAT-NR2Pep-GFP融合蛋白在CHO
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