【摘 要】
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目的: 构建人颗粒溶素(GNLY) 全长编码序列的真核表达载体,转染肿瘤细胞,观察GNLY在细胞内的表达及其对细胞增殖的抑制作用. 方法:用RT-PCR技术获取人GNLY 全长编码序列cDNA,
【机 构】
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南京大学医学院临床学院（南京军区南京总医院）解放军医学检验中心分子生物学实验室
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目的: 构建人颗粒溶素(GNLY) 全长编码序列的真核表达载体,转染肿瘤细胞,观察GNLY在细胞内的表达及其对细胞增殖的抑制作用. 方法:用RT-PCR技术获取人GNLY 全长编码序列cDNA,克隆至pGEM-T 载体进行测序,再将克隆片段插入质粒pcDNA3.1(+)中,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/GNLY,用阳离子聚合物转染试剂转染肝癌细胞系SMMC-7721,检测目的基因mRNA的表达,WST-8法检测细胞增殖活性. 结果:获得人GNLY全长编码序列cDNA ,并成功构建真核表达载体pc
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