【摘 要】
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目的 研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C, CysC)表达对NSCLC A549细胞的生长、侵袭和转移的作用及其潜在的分子机制。方法 采用短发夹RNA(sh-RNA)干扰沉默CysC表达,构建s
【机 构】
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南充市中心医院胸心外科,南充市中心医院肿瘤科
【基金项目】
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四川省科技厅应用基础项目(2017JY0297).
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目的 研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C, CysC)表达对NSCLC A549细胞的生长、侵袭和转移的作用及其潜在的分子机制。方法 采用短发夹RNA(sh-RNA)干扰沉默CysC表达,构建sh-CysC载体,并转染人肺腺癌A549细胞中,筛选sh-CysC稳转子。用CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。此外,还采用Western blot检测侵袭和迁移关键蛋白的表达变化。结果 shRNA干扰CysC,明显下调CysC的表达;与对照组相比,发现shRNA介导的CysC沉默显著抑制A549体外增殖、体外迁移和侵袭。此外,还发现CysC的下调可以显著抑制基质金属蛋白酶(MMP9、MMP14)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结论 shRNA干扰半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,明显下调CysC的表达,CysC的下调可抑制非小细胞肺癌A549细胞的侵袭和迁移。
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