目的 探讨溴苯腈对SH-SY5Y细胞毒性及NF-κB、IκBα表达的影响.方法 以10、50、100 μmol/L溴苯腈分别染毒SH-SY5Y细胞,阴性对照组(0μmol/L)为溶剂DMSO对照组,不含溴苯腈,其余处理均相同.染毒24和48 h后用倒置显微镜下观察细胞形态学变化;用噻唑蓝(MTT)法检测其细胞毒性;染毒12、24、48、72、96 h后用细胞计数法测定SH-SY5Y细胞增殖;染毒24 h后用蛋白免疫印迹(Western blot)法和免疫细胞化学法检测NF-κB的表达,蛋白免疫印迹法检测IκBα的表达.结果 与阴性对照组比较,染毒24和48 h后,50、100 μmol/L溴苯腈组的细胞增殖抑制率均增加,差异有统计学意义(P<0.05);与24h比较,染毒48 h 50、100 μmol/L组的细胞抑制率明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).生长曲线实验结果显示,染毒24 h时各组细胞数目开始出现差异,随着培养时间延长组间细胞数目的差异更加明显,差异有统计学意义(F=17.15,P<0.05).与Oh比较,0μmol/L组48、72、96h时细胞数目开始增加明显,10、50 μmol/L组72、96 h时细胞数目开始增加明显,差异均有统计学意义(P<0.05);100μmol/L组在0~96 h生长曲线中细胞数目无明显变化.与阴性对照组比较,50、100 μmol/L组细胞倍增时间增加,即增殖速度减慢,差异有统计学意义(P<0.05).免疫细胞化学结果显示,随着染毒剂量的增加,胞质、胞核中的棕黄色加深,NF-κB表达增加,并且出现NF-κB人胞核增加的趋势.Westernblot法结果显示,与阴性对照组比较,100μmol/L组细胞胞核中NF-κB的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).与阴性对照组比较,50、100 μmol/L染毒组总蛋白中IκBα的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在本实验条件下,溴苯腈可抑制SH-SY5Y细胞的增殖,可能与NF-κB的激活相关。
溴苯腈对SH-SY5Y细胞毒性及NF-κB表达的影响
【摘 要】
:
目的 探讨溴苯腈对SH-SY5Y细胞毒性及NF-κB、IκBα表达的影响.方法 以10、50、100 μmol/L溴苯腈分别染毒SH-SY5Y细胞,阴性对照组(0μmol/L)为溶剂DMSO对照组,不含溴苯腈,其余处理均相同.染毒24和48 h后用倒置显微镜下观察细胞形态学变化;用噻唑蓝(MTT)法检测其细胞毒性;染毒12、24、48、72、96 h后用细胞计数法测定SH-SY5Y细胞增殖;染毒2
【机 构】
:
430030武汉,华中科技大学同济医学院公共卫生学院卫生毒理学系省部共建国家重点实验室培育基地——湖北省环境卫生学重点实验室环境与健康教育部重点实验室国家环境保护环境与健康重点实验室(武汉),4300
【出 处】
:
中华劳动卫生职业病杂志
【发表日期】
:
2013年31期
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