探讨miR-125a-3p对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响及其在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用。
方法(1)比较肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中565例胶质瘤组织和10例正常脑组织中miR-125a-3p的表达。(2)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2015年4月至2018年4月手术切除并经病理检查证实的胶质瘤标本30例，其中低级别脑胶质瘤7例，高级别胶质瘤23例。另外收集同期因手术入路需要和颅脑外伤切除的正常脑组织标本8例。应用反转录-实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中miR-125a-3p的表达。(3)体外培养正常胶质细胞HA1800及人脑胶质瘤细胞U251、U373、U87、U138、T98G，72 h后应用RT-qPCR检测6组细胞miR-125a-3p的表达；(4)取对数生长期的U251、U373细胞，分为无义序列组和miR-125a-3p模拟物组，应用LipofectamineTM 2000分别转染无义序列和miR-125a-3p模拟物。转染后72 h应用RT-qPCR检测2组细胞miR-125a-3p的表达，克隆形成实验检测2组细胞的增殖情况，流式细胞术检测2组细胞的凋亡情况，Western blotting检测2组细胞凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达。
结果(1)TCGA数据库中，胶质瘤组织中miR-125a-3p的表达低于正常脑组织，差异有统计学意义(P<0.05)。(2)临床收集的正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本中miR-125a-3p的表达依次降低，差异有统计学意义(P<0.05)；(3)与HA1800细胞比较，U251、U373、U87、U138、T98G细胞中miR-125a-3p的表达均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，其中U251和U373细胞中miR-125a-3p表达下降得最明显。(4)与无义序列组比较，miR-125a-3p模拟物组U251和U373细胞中miR-125a-3p的表达增加，克隆形成率降低，凋亡率增加，凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-3、cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-7的表达均增加，磷酸化(p)-P38/MAPK蛋白的表达增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论miR-125a-3p在脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞中表达水平较低，过表达miR-125a-3p可以通过MAPK信号通路抑制胶质瘤细胞的增殖并促进细胞凋亡，其有望为胶质瘤的治疗提供新的潜在靶点。