肺癌中p53基因突变分析及人乳头瘤病毒检测

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拟从分子生物学水平探讨肺癌的早期诊断问题。实验采用p53基因中第6,7,8外显子各设计一对引物,对34例肺癌手术标本进行聚合酶链反应扩增(PCR),产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行单链构象多态性分析(single-strand-conformation-polymor-phism,SSCP),发现30例发生突变,突变率为88.2%,其中鳞癌10/12例,腺癌8/10例,小细胞癌3/3例,大细胞癌1/1例,肺泡细胞癌5/5例,腺鳞癌3/3例。在突变的1例鳞癌中同时伴有杂合性缺失。统计学分析表明,p53突变与组织分型、分化程度、临床分期及吸烟史无密切相关。提示p53突变在肺癌发生过程中起某种作用,可能主要影响肺癌发生的早期。本实验还运用多重引物PCR方法对34例肺癌标本进行人乳头瘤病毒(HPVDNA)检测,发现4例阳性,且皆为鳞癌;而其中3例检测出p53突变。 It is proposed to explore the early diagnosis of lung cancer from the level of molecular biology. A pair of primers were designed for exon 6,5,8 exon in p53 gene. Polymerase chain reaction amplification (PCR) was performed on 34 lung cancer surgical specimens. The product was polyacrylamide gel electrophoresis for single-strand conformation. Single-strand-conformation-polymor-phism (SSCP) found mutations in 30 cases and the mutation rate was 88.2%. Among them, 10/12 squamous cell carcinomas, 8/10 adenocarcinomas, and small cell carcinomas 3 In 3 cases, there were 1/1 large cell carcinoma, 5/5 alveolar cell carcinoma, and 3/3 adenosquamous carcinoma. One case of mutated squamous cell carcinoma was accompanied by loss of heterozygosity. Statistical analysis showed that p53 mutation was not closely related to histological type, differentiation degree, clinical stage and smoking history. It suggests that p53 mutations play a role in the development of lung cancer and may mainly affect the early stage of lung cancer. In this experiment, 34 cases of lung cancer specimens were tested for human papillomavirus (HPV) DNA using multiplex primer PCR. Four cases were positive and all were squamous cell carcinomas. P53 mutations were detected in 3 of them.
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