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目的
探讨microRNA-21(miR-21)反义寡核苷酸对肝星状细胞胶原合成的影响。
方法肝星状细胞分离和培养,利用脂质体2000将miR-21反义寡核苷酸转染活化的肝星状细胞中,转染48 h后,收集肝星状细胞,采用实时RT-PCR法和Western blotting分别检测细胞miR-21表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达;MTT法检测转染后细胞增殖活性。
结果与无关反义寡核苷酸组相比,miR-21反义寡核苷酸转染后miR-21表达较无关对照组下调约76%(P<0.01);细胞增殖活性降低(26±3)%(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分别降低(61±7)%和(48±6)%(均P<0.01)。
结论miR-21反义寡核苷酸能显著下调miR-21的表达,抑制肝星状细胞增殖及胶原的合成。