连续性血液净化治疗患者的血清对体外培养的肠上皮细胞P38MAPK信号通路的影响

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目的体外研究多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者连续性血液净化治疗过程中不同时间点的血清刺激培养的单层肠粘膜上皮细胞促分裂原活化蛋白激酶P38(mitogen activated protein kinase P38,P38MAPK)信号通路活化与诱导型一氧化氮合酶(Induce Nitric Oxide synthase,iNOS)表达水平的关系及其对紧密连接屏障功能的影响。方法用Caco-2细胞在体外建立单层肠粘膜上皮模型,采用MODS患者连续性静脉血液滤过(continuous veno-venous hemofiltration,CVVH)治疗前和治疗后各时间点无菌收集的血清体外刺激培养,检测上述各组刺激培养的上皮细胞中磷酸化P38MAPK蛋白表达水平,iNOS基因表达水平和NO水平的变化。同时观察紧密连接蛋白Occludin的表达和分布。结果与正常对照组相比,MODS患者CVVH治疗前血清刺激培养的单层肠上皮细胞P38MAPK活性明显增高,iNOS基因表达和NO生成水平也明显升高,用P38MAPK信号通路抑制剂SB203580干预后,iNOSmRNA表达和NO生成水平明显降低,同时Occludin蛋白表达水平和分布也明显改善。与CVVH治疗前相比,CVVH治疗6h后的单层肠黏膜上皮细胞P-P38MAPK蛋白表达,iNOSmRNA表达和NO生成水平下降,上述指标表达水平在治疗24h后略有增加,但与治疗前相比仍比统计学差异(P<0.05)。结论连续性血液净化治疗对MODS患者肠粘膜屏障的这种保护作用可能与其减轻全身炎症反应和氧化应激进而下调P38MAPK信号通路活性,抑制iNOSmRNA表达,减少NO生成有关,从而改善了MODS患者的肠粘膜屏障功能。
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