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目的:研究高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中己烯雌酚浓度的不确定度评定方法。方法:对HPLC-MS/MS法测定血浆中己烯雌酚浓度的全过程进行分析,确定不确定度来源,最后根据各分量计算出合成不确定度并进行了扩展。结果:置信概率为95%时,血浆低(0.20ng.mL-1)、中(1.96ng.mL-1)、高(50.41ng.mL-1)质量浓度己烯雌酚的扩展不确定度分别为0.16、0.18、2.48ng.mL-1。结论:本法适用于评价HPLC-MS/MS法测定血浆中己烯雌酚浓度的不确定度研究,对于血药浓度的测定具有重要参考意义。