【摘 要】
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目的研究LOC339524基因对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质bv2细胞系炎症因子表达的影响。方法 100 ng/mL LPS处理bv2细胞3、6、9、12 h用于摸索最佳炎症反应
【机 构】
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陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院麻醉科;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81571870)~~
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目的研究LOC339524基因对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质bv2细胞系炎症因子表达的影响。方法 100 ng/mL LPS处理bv2细胞3、6、9、12 h用于摸索最佳炎症反应时间; 10、100、1 000、10 000 ng/mL LPS处理bv2细胞和100 ng/mL LPS处理bv2细胞3、6、9、12 h用于研究LOC339524蛋白表达变化; si RNA沉默LOC339524和慢病毒转染构建过表达LOC339524的细胞株后加LPS处理用于检测炎症因子变化; qPCR检测TNF-α、IL-6和LOC339524 m RNA水平变化,Western blot检测TNF-α、IL-6和LOC339524蛋白水平变化。结果与0 h相比,LPS处理不同时间均可使TNF-α、IL-6 m RNA和蛋白表达增加(P <0. 05),12 h两者表达一致,选择12 h进行后续炎症反应研究;与0 ng/mL LPS处理组相比,不同浓度LPS均可诱导LOC339524蛋白的表达增加(P <0. 05),100 ng/mL LPS处理后呈时间依赖性增加(P <0. 05)。LPS处理12 h后,si RNA组较无关片段组,TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达显著上调(P <0. 05),反之,过表达组较正常组TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达显著下调(P <0. 05)。结论 LOC339524基因介导了脂多糖诱导bv2细胞的炎症反应。
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