【摘 要】
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利用正交试验设计L9(34)的方法,最终建立了北重楼ISSR-PCR的优化反应体系,即20μL反应体系中包含1×buffer,dNTP 175μmol.L-1,Prim er 0.8μmol.L-1,Mg2+1.4 mmol.L-,Taq酶
【机 构】
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陕西师范大学生命科学学院,西北濒危药材资源开发国家工程实验室
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利用正交试验设计L9(34)的方法,最终建立了北重楼ISSR-PCR的优化反应体系,即20μL反应体系中包含1×buffer,dNTP 175μmol.L-1,Prim er 0.8μmol.L-1,Mg2+1.4 mmol.L-,Taq酶2.5 U及模板DNA 80 ng。适宜的扩增程序为95℃预变性5 m in;94℃变性40 sec,55℃退火45 sec,72℃延伸90 sec,40个循环;72℃延伸7 m in,4℃保存。该优化体系的建立,将为北重楼及其近缘种的系统学和种质资源鉴定及遗
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