【摘 要】
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目的 探讨在丝素-壳聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接种颌下腺细胞后,在大鼠体内构建组织工程化颌下腺的可行性及生物学特性.方法 将36只8周龄SD大鼠分成实验组和对
【机 构】
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中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室
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目的 探讨在丝素-壳聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接种颌下腺细胞后,在大鼠体内构建组织工程化颌下腺的可行性及生物学特性.方法 将36只8周龄SD大鼠分成实验组和对照组,每组各18只.取1～3d龄SD大鼠颌下腺原代细胞培养、传代、细胞来源鉴定后,将第二代细胞标记5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5′-BrdU),制备成5×109个/L的颌下腺细胞悬液,将其接种于5 mm×5 mm×5 mm的SFCS上,体外培养1周后将细胞-支架复合物植入实验组,将单纯SFCS支架植入对照组,分别于3、7、14 d处死大鼠后取材,进行大体、组织学、免疫组织化学及扫描电镜观察.结果 大体观察:植入物表面被膜覆盖,周围组织反应较轻.组织学观察:随着培养时间延长细胞数逐渐增多,细胞黏附于材料表面或分散在支架内,聚集成集落、呈岛状排列,分泌粉染的细胞外基质.BrdU免疫组织化学观察:术后3个时间点均存在阳性细胞.细胞角蛋白8( cytokeratin 8,CK-8)免疫组织化学观察:术后3个时间点均存在阳性细胞,随时间延长数目逐渐增多.扫描电镜观察:SFCS呈网状结构,植入初期的颌下腺细胞呈圆形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或网孔内；随时间延长,颌下腺细胞表面凹凸不平,细胞数目增多,黏附于材料表面并伸出突起,细胞间相互接触.结论 利用SFCS支架接种颌下腺细胞后,可在体内构建组织工程化涎腺样结构,为进一步进行组织工程化颌下腺的研究奠定理论基础.
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