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[目的]构建pEGFP-N1-hTERT真核表达载体，观察其在真核细胞中的表达。[方法]利用pC1-neo-hTERT和pEGFP-N1质粒构建重组质粒，通过双酶切鉴定、DNA测序分析验证人端粒酶逆转录酶基因（hTERT）片段的准确性。将pEGFP-N1-hTERT真核表达载体转染到大鼠胎儿神经干细胞（NSCs）中，通过绿色荧光蛋白间接观察人端粒酶逆转录酶蛋白在细胞中的表达定位，通过RT-PCR、Western Blot验证所构建的真核表达质粒pEGFPN1hTERT的正确性。[结果]所构建的pEGF