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目的建立超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定独一味胶囊(独一味)中胡麻属苷和类叶升麻苷,并研究其在大鼠血浆中的药代动力学特征。方法蛋白沉淀法处理血浆后,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分析;流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱;体积流量为0.4 m L/min。结果类叶升麻苷的线性范围为1250 ng/m L(r=0.998 9),最低定量限为0.2 ng/m L;胡麻属苷的线性范围为0.5100 ng/m L(r=0.998 6),最低定量限为0.1 ng/m L;低、中、高质量浓度的日内、日间精密度RSD均<8.84%,类叶升麻苷的相对回收率分别为(105.33±8.64)%、(101.55±1.22)%和(96.89±5.42)%,而胡麻属苷分别为(103.89±9.18)%、(99.34±6.63)%和(95.88±3.69)%。大鼠静脉注射胡麻属苷和类叶升麻苷后,两者的t1/2分别为(1.45±0.28)h和(0.7±0.25)h,AUC0-t分别为(128.79±30.52)ng/(h·m L)和(98.39±16.52)ng/(h·m L)。结论该方法简便、快捷,灵敏,适用于这两种成分的药代动力学研究。