人Midkine基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :临床与实验病理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dsmhjs
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目的 构建人Midkine(MK)基因RNA干扰(RNA interference, RNAi)慢病毒载体并鉴定,为其体内外实验研究提供基础。方法 设计针对人MK基因序列的4条RNAi靶点序列,分别与慢病毒载体进行连接,获得GV115-MK-1、GV115-MK-2、GV115-MK-3和GV115-MK-4质粒,转染感受态细菌,经PCR及测序技术的鉴定,然后与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染293T细胞,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。4种病毒载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后
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