【摘 要】
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为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv.表达后的上述重组
【机 构】
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南京农业大学动物医学院教育部动物卫生与食品安全国际联合研究实验室,江苏南京210095;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州 730046
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为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv.表达后的上述重组蛋白纯化后免疫小鼠,采集免疫后小鼠的血清,测定血清中的总一氧化氮(NO)、抗体及免疫相关细胞因子,分离小鼠脾,测定小鼠脾淋巴细胞的吞噬功能,最后小鼠腹腔接种弓形虫并绘制小鼠的生存曲线.结果 显示,成功表达了弓形虫重组蛋白H2Bb (rTgH2Bb)及重组蛋白H2Bv(rTgH2Bv).Western-blot结果表明重组蛋白具有良好的免疫原性.重组蛋白rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清中IgG1的水平在一免和二免后均与对照组差异显著(P＜0.05),rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清细胞因子γ干扰素的水平在一免及二免后均有显著提高(P＜0.05).rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠血清中NO含量在2次免疫后均显著高于对照组(P＜0.05).二免后重组蛋白rTgH2Bb免疫组和rTgH2Bv免疫组小鼠脾淋巴细胞的吞噬能力均显著高于对照组(P＜0.05).攻虫感染后,rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠的生存时间较对照组相比有所延长.结论:重组蛋白rTgH2Bb和rTgH2Bv有一定的抗弓形虫急性感染的作用,具有作为弓形虫疫苗候选抗原的潜在价值.
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