【摘 要】
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目的评价内侧前额叶皮质(mPFC)小胶质细胞P2X7受体在大鼠神经病理性痛中的作用及其与自噬的关系。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠64只,6~8周龄,体重200~250g,采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)、假手术 P2X7受体阻断组(SP组)和神经病理性痛 P2X7受体阻断组(NP P组)。采用坐骨神经干结扎法制备大鼠神经病理性痛模型,14d后通过脑立体定位仪于内侧前额叶皮质置入套管,SP组和NP P组第14天开始连续3d双侧mPFC注射P2X7受体阻断剂
【机 构】
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目的评价内侧前额叶皮质(mPFC)小胶质细胞P2X7受体在大鼠神经病理性痛中的作用及其与自噬的关系。
方法SPF级健康成年雄性SD大鼠64只,6~8周龄,体重200~250 g,采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)、假手术 P2X7受体阻断组(SP组)和神经病理性痛 P2X7受体阻断组(NP P组)。采用坐骨神经干结扎法制备大鼠神经病理性痛模型,14 d后通过脑立体定位仪于内侧前额叶皮质置入套管,SP组和NP P组第14天开始连续3 d双侧mPFC注射P2X7受体阻断剂A-740003 0.5 μg/0.5 μl,S组和NP组第14天开始连续3 d双侧mPFC注射二甲基亚砜0.5 μl。于造模后3、7、10 d及14、15、16 d给药后30 min时,测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。随后处死大鼠取mPFC,采用qRT-PCR法检测P2X7受体mRNA的表达,采用Western blot法检测P2X7受体、自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的表达,采用免疫荧光法检测P2X7受体与Iba-1共表达情况,透射电镜下观察并计数mPFC自噬体。
结果与S组比较,NP组和NP P组造模后3、7和10 d时MWT降低,TWL缩短,造模后16 d给药后30 min时P2X7受体及其mRNA、Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ表达上调,P2X7受体与Iba-1共表达细胞数和自噬体数增加(P
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