人脐带血清器官培养液保存猪角膜的实验研究

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目的 观察胎牛血清器官培养液和人脐带血清器官培养液对猪角膜内皮细胞形态学、组织学、超微结构、酶活性及代谢等的影响.方法器官培养方法:4周以内31℃密闭培养,之后脱水24h.选择猪眼113只,其中100只角膜分为两组进行配对器官培养保存.第1组(50只角膜):应用培养液Ⅰ(含10%胎牛血清);第2组(50只角膜,第1组的对侧角膜):应用培养液Ⅱ(含10%人脐带血清).13只角膜作为正常对照.器官培养每周每组各取出12只角膜进行内皮细胞形态学分析、HE染色、酶组织化学染色.保存2周、4周时行扫描电镜检查.检测保存前后培养液的pH值和葡萄糖、乳酸浓度.器官培养过程中行微生物学检测.结果器官培养期间角膜内皮细胞单层保持完整,多形性增加,两组之间角膜内皮细胞密度、细胞面积的变异系数和六边形细胞比例在保存4周内差异无显著意义.保存4周的猪角膜与正常猪角膜相比,平均内皮细胞丢失率第1组为10.98%,第2组为10.85%.两组角膜器官培养后的组织学、超微结构、酶活性无明显区别.扫描电镜显示内皮细胞层完整,细胞形态改变.酶组织化学染色显示上皮、内皮细胞酶活性旺盛,基质细胞的酶活性随保存时间的延长而降低.角膜代谢状态良好.器官培养液污染率为6%.结论两种器官培养液均可以保持角膜内皮活性达4周,推测人脐带血清能够替代胎牛血清作为角膜器官培养液的成分.(中华眼科杂志,2004,40:533-538)

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