可表达骨形态发生蛋白-4的真核表达载体的构建与鉴定

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dna0716

【摘要】

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目的构建含有骨形态发生蛋白（hBMP）-4的真核表达载体pcDNA3．1（＋）／hBMP-4。方法将质粒pCS2（＋）／hBMP-4用Eco RⅠ单酶双切获得目的基因片段，真核载体pcDNA3．1（＋）用EcoRⅠ酶切线性化，对上述两种酶

【作者】

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王兴宇汪春兰李栋梁赵宇王帮河何金生

【机构】

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安徽医科大学第一附属医院整形外科,安徽医科大学免疫学教研室

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

骨形态发生蛋白质类基因表达 bone morphogenetic proteins gene expression

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目的构建含有骨形态发生蛋白（hBMP）-4的真核表达载体pcDNA3．1（＋）／hBMP-4。方法将质粒pCS2（＋）／hBMP-4用Eco RⅠ单酶双切获得目的基因片段，真核载体pcDNA3．1（＋）用EcoRⅠ酶切线性化，对上述两种酶切产物分别回收纯化后进行连接，筛选出正确的转化子，并进一步转染COS-7细胞，提取总RNA和总蛋白，进行RT—PCR和Western—blot检测。结果获得了含有目的基因片段的真核表达载体，酶切及基因测序提示构建正确，RT—PCR检测到目的基因的转录，Western—bl

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