【摘 要】
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目的:探讨姜黄素在体外抑制脉络膜新生血管(CNV)生成的作用及机制.方法:氯化钴(CoCl2)诱导人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞建立化学性缺氧模型,采用CCK-8法检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19细胞活性的影响,采用RT-qPCR和Western blot检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19缺氧模型细胞内AKT、HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白表达的影响.采用细胞划痕实验、Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验及Matrigel基质胶管腔形成实验,观察
【机 构】
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100091 中国北京市,中国中医科学院西苑医院眼科;100040 中国北京市,中国中医科学院眼科医院
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目的:探讨姜黄素在体外抑制脉络膜新生血管(CNV)生成的作用及机制.方法:氯化钴(CoCl2)诱导人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞建立化学性缺氧模型,采用CCK-8法检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19细胞活性的影响,采用RT-qPCR和Western blot检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19缺氧模型细胞内AKT、HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白表达的影响.采用细胞划痕实验、Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验及Matrigel基质胶管腔形成实验,观察在非接触情况下ARPE-19细胞姜黄素的条件培养液对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、侵袭和管腔形成的影响.结果:100μmol/L CoCl2可成功建立ARPE-19细胞化学缺氧模型.CoCl2在100μmol/L浓度下促进ARPE-19细胞中AKT、HIF-1α 和VEGF mRNA及p-AKT、HIF-1α 和VEGF蛋白的表达.姜黄素在浓度为100μmol/L时可减少ARPE-19细胞中AKT、HIF-1α 和VEGF mRNA及p-AKT、HIF-1α和VEGF蛋白的表达.ARPE-19细胞姜黄素低(6.25μmol/L)、中(25μmol/L)、高剂量组(100μmol/L)条件培养液可显著抑制HUVEC细胞水平迁移;其中高剂量组条件培养液可显著抑制HUVEC细胞垂直迁移和细胞侵袭.ARPE-19细胞姜黄素中、高剂量组条件培养液可抑制HUVEC细胞管腔形成.结论:姜黄素在100μmol/L对CoCl2诱导ARPE-19细胞缺氧有保护作用.姜黄素可在细胞水平抑制血管的生成.
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