【摘 要】
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目的:克隆hIL-1Ra基因并在大肠杆菌中高效表达.方法:从人外周血中分离白细胞并提取其总RNA.用RT-PCR获得hIL-1Ra cDNA,克隆入pBV220表达载体进行诱导表达.对表达产物进行复性
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
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目的:克隆hIL-1Ra基因并在大肠杆菌中高效表达.方法:从人外周血中分离白细胞并提取其总RNA.用RT-PCR获得hIL-1Ra cDNA,克隆入pBV220表达载体进行诱导表达.对表达产物进行复性和纯化.结果:成功地构建了pBV220-IL-1Ra表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达,表达量占全菌的40%.对表达产物进行分离纯化及活性分析表明,获得纯度大于98%的样品.该样品具有明显抑制IL-1刺激EL-4细胞分泌IL-2的作用.结论:在大肠杆菌中成功地表达有活性的hIL-1Ra基因,为进一步的开发利用奠定了实验基础.
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