大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP质粒构建及其在HEK293细胞中的表达

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：judy17318

【摘要】

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提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增μ型阿片受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,纠正点突变后,经酶切连接克隆入pIRES2-EGFP中,测序及酶切结果表明μ基因

【作者】

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胡子有漆松涛张遐张兰兰吴炳义

【机构】

：

南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心,南方医科大学南方医院神经外科,渥太华大学心理健康研究所

【出处】

：

生命科学研究

【发表日期】

：

2009年6期

【关键词】

：

Μ型阿片受体巢式PCR pIRES2-EGFP质粒 HEK293细胞 μ opioid receptor nested PCR pIRES2-EGFP

【基金项目】

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国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金资助项目（30628018）

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提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增μ型阿片受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,纠正点突变后,经酶切连接克隆入pIRES2-EGFP中,测序及酶切结果表明μ基因正确,μ-pIRES2-EGFP质粒构建成功.用脂质体法将μ-pIRES2-EGFP转染入HEK293细胞中,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光,应用免疫组化荧光可以观察到μ基因的高强度表达.

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