【摘 要】
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目的 探索异基因造血干细胞移植联合内皮祖细胞(EPC)输注对骨髓炎性损伤的影响.方法 6～8周龄BALB/c(H-2Kd)小鼠经致死剂量全身照射(TBI)预处理后建立异基因骨髓移植模型(BMT组
【机 构】
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221002,徐州医科大学附属医院
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目的 探索异基因造血干细胞移植联合内皮祖细胞(EPC)输注对骨髓炎性损伤的影响.方法 6～8周龄BALB/c(H-2Kd)小鼠经致死剂量全身照射(TBI)预处理后建立异基因骨髓移植模型(BMT组),并在BMT基础上同时输注体外培养的EPC,建立骨髓联合EPC移植模型(EPC组).移植后第7、14、21、28天分别获取各组小鼠骨髓细胞,流式细胞术检测EPC培养比率及两组嵌合率变化,通过骨髓细胞和外周血细胞计数比较两组骨髓造血情况,Western blot法检测骨髓巨噬细胞表面特异性标志CD68表达水平;实时定量PCR及Western blot法分析骨髓炎性复合体nlrp1、nlrp6、caspase-1mRNA及蛋白表达水平.结果 移植后第7天BMT组嵌合率为(83.69±1.26)％,明显低于EPC组的(91.65±2.77)％(P＜0.05).在移植后第10、15、20天,EPC组小鼠外周血中的WBC、网织红细胞、PLT均高于BMT组(P值均＜0.05),在第7、21天EPC组骨髓中原始红细胞较BMT组高(P值均＜0.05).HE染色显示,移植后第7、14、21天,EPC组骨髓微环境恢复较BMT组快.Western blot检测显示EPC组骨髓CD68蛋白表达水平较BMT组低.EPC组nlrp1、nlrp6、casepase-1 mRNA及蛋白表达水平在移植后各时间点接近正常表达水平,与BMT组相比,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).结论 异基因造血干细胞移植联合输注EPC可减少炎性细胞的浸润及减少炎性复合体的活化,促进骨髓造血重建.
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