【摘 要】
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目的帕尼单抗是一种IgG2亚类抗体,已用于转移性结肠癌的临床治疗。然而尚没有研究对帕尼单抗中二硫键异构体的构成和活性进行分析鉴定。本实验将建立对帕尼单抗二硫键异构体
【机 构】
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新乡医学院基础医学院; 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心; 新乡医学院生物医学工程学院; 新乡医学院生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81703054;U1304302);河南省高等学校重点科研项目计划资助(17A350012);新乡医学院博士启动基金资助(XYBSKYZZ201506);河南省科技攻关计划资助(172102310614);国家大学生创新训练计划资助(201710472029)
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目的帕尼单抗是一种IgG2亚类抗体,已用于转移性结肠癌的临床治疗。然而尚没有研究对帕尼单抗中二硫键异构体的构成和活性进行分析鉴定。本实验将建立对帕尼单抗二硫键异构体鉴定并富集的方法,进一步分析异构体间的生物学活性差异。方法利用反相色谱分析帕尼单抗中二硫键异构体的构成;通过氧化还原处理富集A型和B型,并利用分子筛色谱对分离得到的异构体进行分析鉴定;进一步利用细胞杀伤实验对异构体的生物学活性进行评估。结果反相色谱结果表明,帕尼单抗中A型、B型和A/B型比例分别为38%、32%及30%;分子筛色谱结果显示A型的分子半径较之B型更大;细胞杀伤实验表明帕尼单抗的A型具有较B型更强的抑制肿瘤生长效能。结论本实验建立了对帕尼单抗二硫键异构体进行鉴定、富集及分析的方法,有助于进一步增进对IgG2亚类二硫键异构体结构和功能的理解,为IgG2亚类治疗性抗体的生产工艺优化和质量控制提供有益参考。
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