【摘 要】
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对斑马鱼色氨酸羟化酶1a (Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用。根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,检测其对脂代谢基因表达的影响。结果表明:重组蛋白Tph1a表达形式为包涵体;纯化和复性后的蛋白质具有57 ku的特异性条带;腹腔注射复性蛋白后,高脂组斑马鱼acc、pgc1α基因等表达上调,lpl基因表达下调,且pgc1α基因的表达丰度远高于其他脂代谢基因。这一研究
【机 构】
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江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室,江苏海洋大学海洋科学与水产学院,江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室
【基金项目】
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江苏省高校自然科学基金面上项目(17KJB240001,17KJB2400003),江苏省“双创博士”基金资助项目(201801-202012),江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20170450),江苏省海洋生物技术重点实验室开放课题(HS2017001),江苏省高校大学生创新创业训练计划项目(201811641093X),连云港市“海燕计划”项目(2017-QD-014)。
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对斑马鱼色氨酸羟化酶1a (Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用。根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,检测其对脂代谢基因表达的影响。结果表明:重组蛋白Tph1a表达形式为包涵体;纯化和复性后的蛋白质具有57 ku的特异性条带;腹腔注射复性蛋白后,高脂组斑马鱼acc、pgc1α基因等表达上调,lpl基因表达下调,且pgc1α基因的表达丰度远高于其他脂代谢基因。这一研究
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