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摘要目的：利用含报告基因EGFP的pGenesil-1质粒构建干扰AFP蛋白表达的短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达的载体，并进行活性鉴定。方法：设计表达短发夹RNA的互补DNA序列，经退火成双链，克隆至带有U6启动子的质粒载体pGenesil-1中，构建重组质粒，转化大肠杆菌DH5a菌株，扩增，提取质粒，酶切鉴定后测序分析。构建正确的重组质粒经脂质体转染HepG2细胞，检测转染率和培养细胞上清的AFP含量变化，确定重组质粒的活性。结果：构建了靶向AFP蛋白的2个shRNA