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目的
评价吸入氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤时蛋白质组学的影响。
方法雄性ICR小鼠60只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=15):假手术组(Sh组)、假手术+氢气组(Sh+H2组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢气组(S+H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症模型,于术后1、6 h时Sh+H2组和S+H2组均吸入2%氢气1 h。于术后24 h时,分离肺组织,对蛋白质进行同位素相对和绝对定量标记、液质联用-串联质谱分析,筛选差异表达蛋白质,对差异表达蛋白质进行KEGG通路富集分析及STRING蛋白质互作网络分析。并采用Western blot法测定脑信号素7A、转铁蛋白、OTULIN和丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1等4个差异表达蛋白质的表达。
结果共鉴定到4 472个可定量蛋白质,筛选出192个蛋白质与吸入氢气减轻脓毒症时急性肺损伤有关,这些蛋白质涉及磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶信号通路、趋化因子信号通路、缺氧诱导因子1信号通路、补体与凝血级联反应和过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路等,涉及蛋白质互作网络中的核糖体蛋白、肌球蛋白与肌钙蛋白、胶原蛋白与粘附蛋白和凝血相关蛋白。Western blot法测定上述4个蛋白质的表达趋势与蛋白质组学结果一致。
结论吸入氢气可引起脓毒症小鼠肺组织192个蛋白质表达变化,这可能是其肺保护作用的机制。