【摘 要】
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目的探讨人结肠癌细胞HT29对5－氟尿嘧啶化疗耐药与高尔基磷蛋白3(Golgiphosphoprotein 3, GOLPH3)基因表达的关系及其机制。方法将HT29细胞分为4组：对照组(HT29)、转染组(siRNA－GOLPH3)、实验组1(30 μmol/L 5－FU)、实验组2(siRNA－GOLPH3＋30 μmol/L 5－FU)。用RT－PCR和Western blot检测HT29细
【机 构】
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福建医科大学附属第二医院普外科，泉州 362000,福建医科大学附属第二医院普外科，泉州 362000,厦门市第五医院肛肠科 361101,福建医科大学附属第二医院普外科，泉州 362000,福建医科
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目的探讨人结肠癌细胞HT29对5－氟尿嘧啶化疗耐药与高尔基磷蛋白3(Golgiphosphoprotein 3, GOLPH3)基因表达的关系及其机制。
方法将HT29细胞分为4组：对照组(HT29)、转染组(siRNA－GOLPH3)、实验组1(30 μmol/L 5－FU)、实验组2(siRNA－GOLPH3＋30 μmol/L 5－FU)。用RT－PCR和Western blot检测HT29细胞转染后的沉默效果；MTT和平板克隆实验检测各组HT29细胞增殖、成瘤能力；Western blot检测GOLPH3、P－糖蛋白、β－catenin蛋白的表达。
结果转染组与对照组相比，HT29细胞GOLPH3 mRNA(0.147±0.021比1.000±0.078，t＝12.296，P<0.01)和蛋白的表达量(0.077±0.399比1.003±0.235，t＝6.723，P<0.01)、吸光度A值(0.769±0.086比1.000±0.082，t＝3.885，P<0.01)及成瘤能力(297±21比430±36，t＝5.492，P<0.01)均明显降低，差异均有统计学意义。实验组1、实验组2与对照组相比，吸光度A值(0.803±0.101比1.050±0.140，t＝2.855，P<0.05；0.242±0.091比1.050±0.140，t＝9.664，P<0.001)和成瘤能力(73±8比427±29，t＝20.363，P<0.001；305±22比427±29，t＝5.840，P<0.01)均显著降低，且实验组2的吸光度A值、成瘤能力明显低于实验组1(t＝8.264，P<0.001；t＝17.346，P<0.001)，差异有统计学意义。与对照组相比(0.967±0.094、1.001±0.199、1.000±0.101)，实验组1P－糖蛋白、GOLPH3、β－catenin蛋白表达量(3.634±0.574、2.424±0.261、2.324±0.418)均显著升高(t＝7.944，P<0.01；t＝7.520，P<0.01；t＝5.330，P<0.01)，差异均有统计学意义，实验组2中这些蛋白表达量(0.520±0.176、0.466±0.159、0.933±0.049)较实验组1降低(t＝8.983，P<0.01；t＝11.106，P<0.001；t＝5.724，P<0.01)，差异均有统计学意义。
结论GOLPH3基因表达可通过激活Wnt/β－catenin细胞信号通路参与HT29结肠癌细胞对5－氟尿嘧啶化疗的耐药性。
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