【摘 要】
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目的 应用指数级富集配体系统进化技术(system evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选与鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)特异性结合的ssDNA适配子,建
【机 构】
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武汉大学基础医学院免疫学系,病毒学国家重点实验室,湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室,湖北武汉430071
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目的 应用指数级富集配体系统进化技术(system evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选与鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)特异性结合的ssDNA适配子,建立酶联寡聚核苷酸吸附试验(enzyme-linked oli-gonucleotide assay,ELONA)检测鸟分枝杆菌的方法.方法 设计并合成随机序列ssDNA文库,以鸟分枝杆菌为靶标,利用SELEX技术筛选特异性的ssDNA适配子,将亲和力最高的适配子进行克隆、测序;用DNAMAN软件分析适配子的二级结构,并检测其特异性.结果 单适配子N1与鸟分枝杆菌结合的Kd为(246±21.87) nmol/L,即亲和力最高,而对结核分枝杆菌等其他分枝杆菌亲和力较低.结论 应用SELEX筛选的鸟分枝杆菌ssDNA适配子N1具有较高亲和力和特异性,可作为鸟分枝杆菌检测及艾滋病合并鸟分枝杆菌感染的特异性诊断制剂.
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