雌二醇通过增加端粒酶活性影响人LECs生长动力学的实验研究

来源 :中华实验眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yintaozhy1988
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景

人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关。研究证实,雌激素能增加人子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加人LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道。

目的

探讨β型雌二醇(β-E2)是否能增加人LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响。

方法

体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6 mol/L β-E2分别作用人LECs 0、6、12、24和48 h,采用RT-PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的最佳时间。将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1%乙醇,不同浓度β-E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/L β-E2,继续培养细胞24 h,采用RT-PCR法检测各组人LECs中hHERT mRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况。

结果

1×10-6 mol/L β-E2浓度下能够增加人LECs中hTERT mRNA相对表达量的最佳作用时间为24 h。1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/L β-E2组人LECs中hTERT mRNA的相对表达量分别为0.477±0.015、0.712±0.013和0.914±0.031,明显高于空白对照组的0.428±0.010及溶剂对照组的0.426±0.010,差异均有统计学意义(均P<0.05)。1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/L β-E2组端粒酶活性值分别为0.711±0.015、0.941±0.010和1.249±0.047,明显高于空白对照组的0.535±0.013和溶剂对照组的0.543±0.013,差异均有统计学意义(均P=0.000)。1×10-8 mol/L β-E2组细胞的增生值(A值)明显高于1×10-7 mol/L β-E2组和1×10-6 mol/L β-E2组,差异均有统计学意义(均P=0.000),而1×10-7 mol/L β-E2组和1×10-6 mol/L β-E2组与空白对照组间细胞中的细胞增生值间差异均无统计学意义(P=0.718、0.856)。1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/L β-E2组的细胞凋亡率均低于空白对照组和溶剂对照组(均P=0.000);空白对照组与溶剂对照组间比较差异无统计学意义(P=0.777)。人LECs增生值与hTERT mRNA相对表达量及端粒酶活性值间无明显直线相关关系(r=-0.299,P=0.278;r=-0.157,P=0.576)。人LECs凋亡率与hTERT mRNA相对表达量及端粒酶活性值间均呈明显负相关(r=-0.975,P=0.000;r=-0.981,P=0.000)。

结论

β-E2能上调人LECs中的端粒酶活性,稍高浓度的β-E2可能通过增加人LECs的端粒酶活性而抑制细胞凋亡,但无促增生作用。

其他文献
滨海度假一直是度假旅游的核心产品.本文对国内外滨海度假旅游的研究进行了梳理,分析了我国开发滨海度假旅游的条件,重点探讨了海滩、浴场评价指标.
通过稻壳粮面压盖储粮技术与常规储粮实仓对比试验,研究分析了散装稻壳粮面压盖对中晚籼稻储存品质的影响.从试验结果分析出,采用散装稻壳粮面压盖技术可有效抑制表层粮温升
2017年7月28日04:13,我单位35 kV一降压站1号主变低后备保护屏报低压母线绝缘检查动作,微电脑多功能消谐装置1/3频报警灯亮,6 kVⅡ段母线馈出线路大型Ⅱ线627断路器速断保护
目的:探讨急性上消化道出血患者应用注射用白眉蛇毒血凝酶联合奥美拉唑钠疗法的临床疗效。方法:选取某院2015年1月~2018年3月期间收治的急性上消化道出血患者98例,随机分为对
背景抑制视网膜新生血管形成是目前相关眼病治疗的主要目标之一,而寻找视网膜新生血管形成过程中的干预靶点是研究的热点。研究表明,胰岛素样生长因子1(IGF-1)可促进血管内皮细胞