花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达

来源 :中山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：congmingwangzi

【摘要】

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采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHa、LHβ移基因，再利用搭桥技术，中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβa。然后利用双酶切、连接，将L^氍h基因连接到载体p

【作者】

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毛黎敏张勇李阳源黄海李波李文笙陈国华林浩然

【机构】

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海南大学海洋学院暨热带生物资源教育部重点实验室,中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室∥中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

【出处】

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中山大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2012年2期

【关键词】

：

花鳗鲡促黄体生成激素 LINKER 共表达载体pPICZαA-LHβα 毕赤酵母 Anguilla marmorata luteinizing hormo

【基金项目】

：

国家自然基金面上资助项目（30770283）,广东省教育部产学研结合资助项目（20108090400551）,江苏省科技成果转化专项资金资助项目（BA2009083）,海南省教育厅高等学校科学研究资助项目（Hjkj2008222）

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采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHa、LHβ移基因，再利用搭桥技术，中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβa。然后利用双酶切、连接，将L^氍h基因连接到载体pPICZaA中，构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZaA-LHβa。再利用电转化法将其转入到酵母野生型菌株X-33中，在含不同浓度的zeocinYPDS平板上筛选高拷贝转化子，阳性克隆经Ф=0．7％甲醇诱导表达，表达产物采用SDS-PAGE和westernblot进行分析，得到所表达的产物相对分子质量约为450

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